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按照物質在兩相溶劑中分配比的不同,可以將中藥化學成分分離方法主要歸為液–液萃取法、PH萃取法、柱色譜法這三種,下面就來和幫考網一起看看這三種方法的具體介紹吧。
1.PH萃取法
PH萃取法也是液-液萃取分離的一種,分離原理是依據兩相液體PH值大小不同達到分離目的。一般PH<3時,酸性物質多呈非解離狀態(HA)、堿性物質則呈解離狀態(BH+)存在;但pH>12時,則酸性物質呈解離狀態(A- )、堿性物質則呈非解離狀態(B)存在。據此,可在不同pH的緩沖溶液與有機溶劑中進行分配,使酸性、堿性、中性及兩性物質得以分離。
2.柱色譜法
將兩相溶劑中的一相涂覆在硅膠等多孔載體上,作為固定相,填充在色譜管中,然后加入與固定相不相混溶的另一相溶劑(流動相)沖洗色譜柱。物質在兩相溶劑中相對作逆流移動,在移動過程中不斷進行動態分配而得以分離。這種方法稱之為液-液分配柱色譜法,所用的載體主要有硅膠、硅藻土及纖維素粉等。
通常,分離水溶性或極性較大的成分如生物堿、苷類、糖類、有機酸等化合物時,固定相多采用強極性溶劑(如水、緩沖溶液等),流動相則用三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇等弱極性有機溶劑,稱之為正相色譜;但當分離脂溶性化合物,如高級脂肪酸、油脂、游離甾體等時,則兩相可以顛倒,固定相可用石蠟油,而流動相則用水或甲醇等強極性溶劑,故稱之為反相分配色譜。
常用反相硅膠薄層及柱色譜的填料系將普通硅膠經下列方式進行化學修飾,鍵合上長度不同的烴基(R)、形成親油表面而成。根據烴基(–R)長度為乙基(–C2H5),還是辛基(–C8H17)或十八烷基(–Cl8H37),分別命名為RP-2、RP-8及RP-18。三者親脂性強弱順序為:RP-18> RP-8> RP-2。
3.液–液萃取法
液-液萃取法是根據物質在兩相溶劑中的分配比不同進行分離,簡稱萃取法。
分離的難易用分離因子β值來表示。分離因子β可定義為A、B兩種溶質在同一溶劑系統中分配系數的比值。就一般情況而言,β≥100,僅作一次簡單萃取就可實現基本分離;如果100 >β≥10,通常須萃取10 ~12次;若β≤2時,要想實現基本分離,須作100次以上萃取才能完成;當β≌1時,則意味著兩者性質極其相近,即使作任意次分配也無法實現分離。
紙色譜法的原理與液–液萃取法基本相同,只是兩相中其中一相以固態為基質,與某種液相形成飽和狀態,進而達到分離的目的。
以上三種方法各位小伙伴們都掌握了嗎?小伙伴們要抓緊時間備考了,幫考網相信大家都能順利通過考試。
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2020-06-05
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